(1)、性激素的测定正常人血清T、FSH、LH水平呈快速脉冲式波动，因此，应在早晨每隔20―40分钟采集1次血标本，至少采取3次。测定时，可采取分次测定或从3次标本中各取等量血混合后再进行测定，以便获得均值。因为每个实验室所用的标准品来源不同，所以正常数值也有差别。测定激素尽量采用标准化的方法和技术，对不育症患者检出结果的判断应参考该实验室检查已正常生育过的男性正常值。对男性不育症患者首先应了解血清卵泡刺激素，因为最有意义的血清生殖内分泌激素测定是血清卵泡刺激素(FSH)，根据它的水平可以判断促性腺激素分泌过高、正常及过低，根据此结果可以初步判断内分泌障碍的病因是在睾丸还是在睾丸以上的部位(下丘脑、垂体)。该检查的适应证是精液中无精子、严重的少精子(精子密度<5×106/m1)，且体检睾丸体积大致正常的患者。对患者是否作睾丸活检也需要了解血清卵泡刺激素水平，FSH显著异常的患者不适宜做睾丸活检。对勃起功能障碍，或有雄激素低下体征但FSH不升高的患者，需测定血清睾酮浓度，通过测定了解睾丸Leydig细胞功能以及分泌雄激素情况。血清黄体生成激素(LH)不作为男性不育症生殖内分泌检查的常规，一般的病例检查了FSH、T就可以不测定LH，但对选择性LH缺陷症(fertile ellnuch)等患者就需要做血清LH检查。血清催乳素(PRL)水平增高，可能通过作用于下丘脑，抑制垂体促性腺激素的正常释放，因此，低促性腺激素性性腺功能减低病人均应进行血清PRL测定。男性乳房异常发育患者也应测定血清催乳素(PRL)。临床发现血清催乳素升高的患者应复查一次，因为精神紧张也可能使血清催乳素水平暂时性增高;蛋白质摄入可迅速刺激垂体PRL的释放，因此在取血前应至少禁食3小时;此外服用一些对药物(如镇静药、抗抑郁药等)也可能引起血清催乳素水平的升高，对血清催乳素水平升高的患者需要排除有关药物的影响。排除这些干扰的因素，再进一步考虑检查下丘脑、垂体的情况。肾上腺或睾丸肿瘤导致的男性不育症患者，作血清雌激素测定对诊断有重要的参考价值。
(2)、动态试验为了进一步了解患者生殖内分泌的情况，特别是了解有关内分泌器官和组织的功能 储备情况，以对患者做出更确切的病因分类，可以作有关生殖内分泌激素的动态试验。常用的动态试验有HCG刺激试验、LHRH刺激试验、氯米芬试验。 {河南省商丘市民权县中医院不孕中心电话：135 07692072;0370-8555222} HCG刺激试验的目的是了解睾丸对LH的反应能力，LHRH刺激试验的目的是鉴别下丘脑、垂体是否有功能障碍，氯米芬试验对了解下丘脑一垂体.睾丸轴完整性有参考价值。
1.绒毛膜促性腺激素(HCG)刺激试验 人绒毛膜促性腺激素是糖蛋白激素，具有与LH相似的生物活性。在睾丸中HCG与间质细胞膜上的LH受体结合，刺激间质细胞合成及分泌睾酮。HCG刺激试验可以了解睾丸间质细胞的功能状态及功能储备。方法：HCG刺激试验方法有多种，方法之间的主要区别是给HCG的剂量和方案不 同。下面介绍的方法比较简单和实用。肌肉注射HCG4000IU，每天1次，共4天，在最后一次注射HCG 24小时后测定血浆睾丸酮水平。正常反应为血睾丸酮水平从正常值成倍地增加(增加的幅度为50%一200%)。血睾丸酮水平基础值很低者，应计算增加的绝对数值。也可以采取简便的方法，就是一次肌肉注射HCG(成人.5000Iu/1.7m2，儿童00IU/kg)，注射后72～96小时后取血测睾丸酮。结果分析：原发性性腺功能减低者，刺激后反应明显降低;继发于垂体功能低下的间质细胞功能减低者财呈正常反应;无睾症、睾丸间质细胞不发育、睾酮合成障碍等患1者无反应;隐睾患者有一定反应或反应后延(4～6天才出现反应)。
2.氯米芬(克罗米芬)试验 氯米芬(Clomifene)又称克罗米芬、舒经芬，是一种非类固醇物质，其化学结构与人工合成的乙烯雌酚相似，有很弱的雌激素样生物活性。睾丸间质细胞分泌的雄激素对下丘脑.垂体轴的负反馈作用，是通过其在下丘脑转化为雌激素而实现的。氯米芬进人人体内，可以与下丘脑的雌激素受体结合，故氯米芬使下丘脑组织与雌二醇的结合明显减少，阻断雌激素对下丘脑.垂体轴的负反馈作用，结果是垂体分泌促性腺激素的细胞兴奋，引起促性腺激素释放激素(GnRH)分泌增加，继之LH及FSH分泌增多。氯米芬试验目的主要是为了解下丘脑.垂体储备功能情况。方法：实验开始前，先测定LH、FSH和T的基础值，开始时每天氯米芬200mg，分2次口服，共lO天。服药后第9、10天，分别测定血浆LH、FSH及睾丸酮，采血间隔20分钟，每天采取血标本3次，将3次的血混合后测定。结果分析：正常人LH在试验的第10天比服药前增加70%-250%;FSH在试验的第10天比服药前增加30%～200%;睾丸酮在试验的第10天比服药前增加30%-220%。每个实验室应有自己的正常反应值。患下丘脑或垂体病变者，反应明显降低。单纯性青春期延迟、：Kallmanns综合征等患者无反应。基础值很低者，应计算增加的绝对数值。
3.LHRH促性腺激素释放激素(CnRH)试验促性腺激素释放激素(GnRH)为下丘脑分泌的一种十肽神经激素，GnRH直接刺激垂体分泌促性腺激素的细胞分泌LH及FSH。试验中用人工合成的10肽GnRH。促性腺激素释放激素(CnRH)试验用以检查垂体储备功能。方法：促性腺激素释放激素(GnRH)给药方法，一般采用静脉注射法，受试者早晨空腹先抽血测定基础值，15分钟后快速静脉注射GnRH 100～1.50/Ug，分别在注射后15、30、45、60、90、120及180分钟取血测定血浆LH及FSH浓度。GnRH也可采用静脉持续滴注法，即GnRH 240Ug溶于480ml生理盐水中，以2ml/minq叵速滴注240分钟，在开始滴注后20、30、45、60、90、120、150、180及240分钟时分别取血测定血浆LH及FSH。结果分析：正常男性成年人在注射后2～3分钟LH水平增高，大约30分钟后达高峰，比基础值升高2～5倍;FSH水平上升较慢，比基础值增高约2倍，少数正常人在GnRH刺激后血浆FSH水平不增高。基础值很低者，应计算增加的绝对数值。促性腺激素释放激素(GnRH)试验对鉴别病变是在下丘脑还是在垂体有意义，如注射GnRH后，血的LH及FSH升高，考虑病变在下丘脑;如注射GnRH后，血的LH及FSH不升高，应该考虑是垂体的病变。然而，也有部分病人的病变在下丘脑，但GnRH试验却无反应。对这部分病人可以采取连续注射或滴注GnRH 7―14天，如果仍无反应者病变在垂体;病变在下丘脑者，经过7―14天连续给GnRH，对GnRH刺激的反应可以恢复正常。对上述情况有学者认为，这可能是因为长期缺乏GnRH刺激，垂体分泌促性腺激素的细胞失去对GnRH刺激的正常反应能力，经过7～14天连续给GnRH刺激之后，垂体功能才恢复对GnRH刺激的反应能力。注意，男性性腺功能减低患者对GnRH反应正常，不能除外是由轻度垂体功能减低导致的性腺功能障碍，因为轻度促性腺激素水平降低的患者对GnRH刺激试验的反应可以正常。有原发性睾丸病变者在GnRH刺激下，LH和(或)FSH分泌有过高反应。若病变仅局限在曲细精管，FSH增高反应可以异常，但LH反应正常。