直肠指诊可触及肿胀、饱满的前列腺，压痛明显。有脓肿形成时，两侧腺叶不对称，可能有局限性波动。患病时间较长的，前列腺会变小、变硬、质地不均匀，有小硬结。
应用前列腺按摩的方法获取前列腺液，做常规检查。前列腺液中的白细胞在显微镜高倍视野中超过10个，卵磷脂小体减少，可诊断为前列腺炎。如果同时作细菌培养，可以对慢性前列腺炎做出明确诊断和分类。如前列腺炎液细菌培养结果为阳性，则诊断慢性细菌性前列腺炎；反之，则为慢性非细菌性前列腺炎。
第1杯尿微混，镜检可见白细胞，第2杯尿色清，无白细胞，第3杯尿混浊，有大量白细胞和脓细胞。
急性前列腺炎仅可作指诊检查，切忌前列腺按摩，防止感染向附睾、睾丸扩散，或细菌进入血液引起菌血症。尿液检查可见脓细胞、红细胞，B超检查亦有助于诊断。
可作直肠指诊触及前列腺按摩。尿液和前列腺液分段定位培养用于慢性前列腺炎的诊断，也有一定价值。慢性前列腺炎时前列腺液pH增高、锌含量降低，对诊断也有一定帮助。